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Time-Correlated Single Photon Counting

StrobeLock es una extensión para la serie de microscopios WITec alpha300, que permite realizar mediciones de recuento de fotones individuales correlacionados con el tiempo (TCSPC). El TCSPC registra el decaimiento de la luminiscencia o de la fluorescencia en función del tiempo tras la estimulación pulsada. En la Microscopía de Luminiscencia Resuelta en el Tiempo (TLM), el decaimiento de la intensidad se registra en cada píxel de la imagen. Se pueden determinar varios parámetros que describen cada decaimiento, como los tiempos de relajación uni o incluso multiexponenciales. A continuación, las imágenes pueden codificarse por colores en función de cualquiera de los parámetros extraídos, revelando las diferencias locales en el comportamiento de la emisión de una muestra. Por ejemplo, la extracción del tiempo de vida media de los compuestos fluorados permite obtener imágenes del tiempo de vida de la fluorescencia (FLIM). Si se combinan los datos resueltos en el tiempo con imágenes Raman, AFM o SNOM, se obtiene información adicional sobre los materiales investigados.


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Ventajas de StrobeLock


Microscopia de Luminiscencia Resuelta en el Tiempo (TLM)

Con la Microscopía de Luminiscencia Resuelta en el Tiempo (TLM), se pueden investigar las propiedades luminiscentes de los dispositivos emisores de luz, como los LED, y revelar las diferencias espaciales. La emisión de luz se estimula mediante un generador de impulsos eléctricos y su intensidad se registran en función del tiempo. De este manera, se pueden calcular los tiempos de relajación o los tiempos de respuesta para cada píxel de la imagen y visualizarlos. TLM puede utilizarse, por ejemplo, para el control de calidad de los LED.

WITec StrobeLock Time resolved Luminescence
Microscopía de luminiscencia resuelta en el tiempo (TLM) en un diodo emisor de luz azul (LED).
Izquierda: Mapa de los tiempos de relajación local; barra de escala de 7 µm.
Derecha: Gráfico de contorno del inicio temporal de la emisión de luminiscencia; barra de escala 10 µm.

Imágenes de Tiempo de Vida Fluorescente (FLIM)

La microscopía de imágenes de fluorescencia (FLIM) determina el tiempo de vida medio de la fluorescencia para cada píxel de la imagen, a partir de la decadencia de la fluorescencia resuelta en el tiempo, tras la excitación con un láser pulsado. La imagen FLIM resultante se codifica por colores según el tiempo de vida, mostrando su distribución espacial en una muestra. En combinación con otras técnicas, como la imagen Raman o la AFM, FLIM aumenta considerablemente la cantidad de información obtenida de una muestra.

WITec StrobeLock FLIM
Imágenes de duración de la fluorescencia (FLIM) en agujas de cristal de N,N′-bis(1-etilpropil)-3,4,9,10-perilenobis(dicarboximida) (EPPTC). Izquierda: intensidad total de fluorescencia; barra de escala de 5 µm. Derecha: FLIM; barra de escala 5 µm.
Las imágenes son cortesía de Xinping Zhang, del Instituto de Tecnología Fotónica de la Información y de la Facultad de Ciencias Aplicadas de la Universidad Tecnológica de Pekín.

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