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Microscopía de campo claro y fluorescencia

Los microscopios de creación de imágenes WITec están equipados con una configuración de iluminación Köhler con componentes ópticos optimizados para generar imágenes de campo claro de excelente calidad. Ofrecemos diferentes opciones que incluyen imágenes de campo claro y oscuro y contraste de interferencia diferencial (DIC). La microscopía de luz clara es posible en los modos de reflexión y transmisión y puede incluir configuraciones de polarización.

Opcionalmente, los sistemas WITec pueden integrar microscopía de fluorescencia para enfoques correlativos.


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Características


Opciones de Microscopía de Campo Claro

Los microscopios de obtención de imágenes WITec pueden integrar opciones de campo claro en modo de reflexión o transmisión, además de otras técnicas como el contraste de interferencia diferencial (DIC) y la obtención de imágenes de campo oscuro.

Apilamiento de planos de enfoque y unión de imágenes

Todas las técnicas de microscopía óptica de los microscopios WITec disponen de apilamiento de planos de enfoque y unión de imágenes controlados por software. Con el apilamiento de enfoques se pueden generar rápidamente imágenes nítidas de muestras de altura variable a partir de una pila de imágenes individuales. La unión de imágenes automatizada combina una serie de mediciones individuales en una imagen de área extensa con la máxima resolución.

Microscopía de Campo Claro Polarizado

La microscopía de luz clara de los microscopios WITec puede ampliarse opcionalmente con módulos de polarización, idóneos para aplicaciones en geología, biología, química y ciencia de materiales. El control independiente del polarizador (camino de excitación) y del analizador (camino de detección) facilita diferentes configuraciones de iluminación de polarización en orientaciones paralelas y perpendiculares.

Polymer blend of PS and PMMA in differential interference contrast (DIC) microscopy
Polymer blend of PS and PMMA in white light microscopy
Luz clara (izquierda) e imagen DIC (derecha) de una mezcla polimérica de PS y PMMA. Imagen DIC adquirida con un objetivo Epiplan-Neofluar DIC 100x/0,9NA.
Image stacking
Partícula visualizada mediante microscopía de campo oscuro sin (izquierda) y con apilamiento de enfoque (derecha).

Descubra las extraordinarias prestaciones de microscopía óptica de WITec

Las capacidades de microscopía de campo claro de los sistemas WITec convencen por su excepcional rendimiento. En este ejemplo, se encontraron fácilmente pequeñas inclusiones en un diamante, aunque estaban situadas a 20-50 µm por debajo de la superficie. Las imágenes Raman confocales en la misma posición revelaron la composición de las inclusiones.


Diamond inclusion overview
Diamond inclusion inset
Diamond inclusion Raman image
Izquierda: imagen de transmisión (objetivo 5x/0,13 NA) de un diamante con inclusiones. Centro: Ampliación de una pequeña inclusión en el diamante (objetivo 100x/0,9 NA). Derecha: Imagen Raman de la inclusión en la zona delimitada. Rojo: Diamante; Azul: Gel; Verde: Piropo (mineral).

Microscopía de fluorescencia

Combine la microscopía Raman y la obtención de imágenes de fluorescencia en un solo instrumento. La configuración de fluorescencia opcional para los microscopios WITec utiliza excitación láser y cuenta con una cámara monocromática de alta sensibilidad para la detección. Hay disponibles filtros de emisión a juego para un gran número de combinaciones de longitudes de onda compatibles.


Imágenes Raman y de fluorescencia correlativas de células en cultivo. Izquierda: núcleos celulares teñidos con el marcador de fluorescencia DAPI. Centro: Retículo endoplásmico (verde) y nucleolos (naranja) identificados con Raman. Derecha: Imagen superpuesta.

Ejemplos de Aplicación

Biotite mineral imaged using polarization-resolved white-light microscopy
Análisis de la sección delgada de mineral de biotita con diferentes modos de iluminación de luz clara con resolución de polarización. Reflexión no polarizada (A), modo de transmisión (B), polarización paralela (C) e imagen de transmisión con polarización cruzada (D).
Image stitching
Imágenes de campo claro (izquierda) y campo oscuro (derecha) de partículas de una medición con ParticleScout.
Feldspar matrix with actinolite fibers in transmission white light microscopy
Detección de fibras de actinolita en una matriz de feldespato con microscopía de transmisión. Imagen cortesía de Didier Lahondère y Guillaume Wille, Servicio Geológico Francés, Orleans (BRGM).

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